小儿吐泻宁^[1]由广藿香、姜半夏、陈皮、白术（炒）、茯苓、厚朴(姜制)、甘草等中药组方，具有理气和中、健脾化湿功效，用于小儿脾胃不和引起的吐泻、腹胀，不思饮食等。制剂中厚朴燥湿消痰、下气除满，用于湿滞伤中，脘脾吐泻，食积气滞，腹胀便秘，痰饮咳喘。目前该药品的质量标准中无含量测定项目^[2]，而厚朴酚、和厚朴酚为厚朴的活性成分^[3-6]。为完善质量控制标准，本文参考相关文献^[7-20]，对小儿吐泻宁中厚朴酚、和厚朴酚进行含量测定方法研究，优选了检测条件、提取方法，有效排除了干扰因素，以为更好地控制该药品的质量提供科学依据。

1 仪器与试药

岛津2010A高效液相色谱仪（岛津紫外检测器，LC solution色谱工作站）；AG285电子分析天平（瑞士梅特勒托利多公司）、KQ-400KDE型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

厚朴酚对照品（批号：110729-200310）、和厚朴酚对照品(批号：110730-200307，纯度98.4%）购于中国食品药品检定研究院；小儿吐泻宁（哈药集团世一堂制药厂，批号为130508，山西华康药业股份有限公司，批号为130203、140602）；水为超纯水，甲醇为Merck公司生产的色谱纯。

2 方法与结果 2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm, 5µm）；流动相：甲醇-水（70:30）；流速：1.0 mL·min^-1；检测波长：294 nm；柱温30℃；进样量10 µL。理论板数按和厚朴酚计算不低于3000。分离度均大于1.5。

2.2 溶液的制备 2.2.1 混合对照品溶液的制备

分别精密称定厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，加入甲醇溶解并稀释，分别制成质量浓度为0.4028、0.6037 mg·mL^-1的对照品储备液。再分别量取对照品储备液各2.5 mL，置25 mL容量瓶里，加甲醇稀释到刻度，摇匀，得混合对照品溶液，即厚朴酚、和厚朴酚的质量浓度分别为40.28、60.37 µg·mL^-1。

2.2.2 供试品溶液的制备

2供试品溶液的制备取本品1.0 g（3.0546 g·袋^-1），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理40 min，放冷至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

2.2.3 阴性样品溶液的制备

按照小儿吐泻宁处方工艺制成不含厚朴的空白样品，按照“2.2.2”节下供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.3 线性关系考察

分别精密吸取厚朴酚、和厚朴酚对照品混合溶液1、2、5、10、15、20 µ L，注入液相色谱仪，记录峰面积，以对照品进样量（µg）为横坐标（X），峰面积积分值为纵坐标（Y），进行回归分析，得厚朴酚回归方程：Y=2.1687×10⁶X+617.1491 r=1.0000；和厚朴酚回归方程：Y=3.5615×10⁶X+397.4595 r=1.0000。结果表明：厚朴酚在0.0403~0.8056 µg的范围内具有良好的线性关系；和厚朴酚在0.0604~1.2074 µg的范围内具有良好的线性关系。

2.4 精密度试验

精密吸取对照品混合溶液10 µL，连续进样6次，以峰面积计算，厚朴酚的平均峰面积值为874717.5，RSD=0.35%；和厚朴酚的平均峰面积值为2157054.0，RSD=0.69%，结果表明仪器精密度良好。

2.5 稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液，在室温下放置0、2、4、8、12、24 h后，分别进样10 µL，记录峰面积，结果厚朴酚峰面积的平均值447643，RSD=0.65%；和厚朴酚峰面积的平均值161032.2，RSD=0.86%。结果表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.6 重复性试验

称取同一批样品（批号130508）6份，按供试品溶液的制备方法制备，测定含量，厚朴酚平均含量为1.44 mg·袋^-1，RSD=1.1%；和厚朴酚平均含量为4.20 mg·袋^-1，RSD=1.3%。结果表明本方法具有良好的重复性。

2.7 阴性对照试验

精密吸取对照品混合溶液、供试品溶液、阴性样品溶液，按“2.1”节下方法测定，记录色谱图。供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，有一相同保留时间的色谱峰，阴性对照无干扰（图 1）。

2.8 加样回收试验

精密称取已知含量的同一批号样品（厚朴酚含量：1.43 m g ·袋^-1；和厚朴酚含量：4.19 m g ·袋^-1；平均装量：3.0546 g·袋^-1）0.5 g，精密称定，置50 mL容量瓶中，分别精密加入厚朴酚对照品溶液（0.0230 mg·mL^-1）、和厚朴酚对照品溶液（0.0680 mg·mL^-1）10 mL，甲醇稀释至刻度，称定重量，超声处理40 min，放冷至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，作为加样供试品溶液。按“2.1”节下色谱条件进行测定，并计算回收率，结果见表 1。

2.9 样品含量测定

取小儿吐泻宁颗粒3批，按“2.2.2”节下供试品溶液制备方法，按“2.1”节下色谱条件测定本品中厚朴酚、和厚朴酚含量，结果见表 2。

3 讨论

本文供试品溶液的制备及波长的选择参照《中国药典》2010年版一部中“厚朴”含量测定项下的方法和条件，以甲醇-水（70:30）为流动相，对比例进行了适当的调整，使分离度更好。方中厚朴为主药，厚朴酚、和厚朴酚是其主要成份，且含量高，易于测定，故采用测定处方中厚朴的总量来控制该制剂的质量。

选取甲醇、80%甲醇、乙醇分别对供试品超声提取40 min进行提取效果比较，结果显示甲醇超声提取效果最佳，各组分含量高于80%甲醇、乙醇提取组；选取甲醇超声提取20 min、40 min、60 min，考察超声提取时间对提取效率的影响，结果表明超声提取40 min各组分与提取60 min差异不大，但明显高于20 min，故选甲醇超声提取40 min作为供试品溶液的最佳提取方案。