红曲（Fermentum Rubrum）是将曲霉科真菌紫色红曲霉（Monascus purpureus Went）菌株接种于稻米（去皮种仁）上，经人工培育制成的一种食药双效发酵制品，具有良好的降脂活性，是血脂康、脂必妥等天然他汀类降脂药物的原料，临床用于高脂血症、动脉粥样硬化等症的治疗^[1-2]。研究表明，红曲降脂作用的主要功效成分为其次级代谢产物洛伐他汀，作为胆固醇合成途径中HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂，洛伐他汀可以有效减少或阻断内源性胆固醇的合成。洛伐他汀有酸型和内酯型两种形式，如图 1所示，两者在红曲中同时存在，其中，酸型洛伐他汀结构更接近HMG-CoA还原酶，故其生物学活性更强^[3-4]。但酸型洛伐他汀的化学稳定性较差，价格昂贵，不易获得和保存，故市售洛伐他汀对照品采用内酯型。

红曲虽然应用广泛，全国各地均有生产（以福建产的最为著名），但是目前尚无统一的质量标准。《中国药典》（2015年版）无单独的红曲药材标准，仅在血脂康胶囊项下给出了用于该成药的红曲原料质量标准。该标准规定：“红曲原料的指纹图谱应与药典收载的对照指纹图谱一致；洛伐他汀的含量应不低于0.22%”。但是，据文献^[4-8]报道，目前市场上有不少红曲药材中洛伐他汀的含量低于0.22%。为了调研红曲药材的质量现状，为该药材的质量控制提供依据，本论文对流通市场上随机抽取的红曲药材质量进行了考察。

1 方法

依据《中国药典》（2015年版一部）血脂康胶囊项下的红曲质量标准^[9]。

2 色谱条件

Waters色谱系统，配备e2695型四元泵，2998型PDA检测器（检测波长：200 nm ~ 600 nm，提取波长：256 nm），色谱柱：Cosmosil 5C18-MS-Ⅱ，规格：250 mm×4.6 mm，5 µm；柱温：30℃；流动相A为乙腈，流动相B为0.05%磷酸水溶液，梯度洗脱如表 1所示；流速：1.0 mL·min^-1；供试品溶液和对照品溶液的进样体积：20 µL；色谱记录时间：65 min。

3 试药

乙腈为色谱纯（Sigma公司），磷酸为分析纯，水为Milli-Q超纯水。

红曲样品共5批，从安国市场上5家药材供应商处随机购买。红曲对照药材（批号121658-201101）由我院提供。我院提供的洛伐他汀对照品（批号100600-201504）为内酯型。

4 溶液的配制 4.1 供试品溶液的配制

取本品3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈10 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用乙腈补足减少的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4.2 内酯型洛伐他汀对照品溶液的配制

取洛伐他汀对照品11.21 mg，精密称定，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

4.3 酸型洛伐他汀的制备^[6-8]

取洛伐他汀对照品11.10 mg，精密称定，置于10 mL量瓶内，用0.1 moL·L^-1 NaOH溶液（用75%乙醇配制）溶解并稀释至刻度，在50 ℃水浴中加热转化1 h，放冷，精密加入1 mL 1 moL·L^-1盐酸中和，混匀，即得。

4.4 混合对照品溶液的配制

取“4.2”和“4.3”节下的内酯型洛伐他汀对照品溶液和酸型洛伐他汀溶液，按照1：1比例混合，作为混合对照品溶液。

5 结果

5批红曲样品的指纹图谱（2A~2E）与《中国药典》中收载的红曲对照指纹图谱（2G）均有显著性差异，如图 2所示；全部样品均未呈现对照指纹图谱中的10个特征峰；而且各指纹图谱之间也有显著性差异。而红曲对照药材的指纹图谱（2F）则能呈现对照指纹图谱中的10个特征峰。

5批红曲样品中均未检出洛伐他汀：酸型和内酯型洛伐他汀对照品的保留时间分别为30.12 min和35.72 min，两者的UV提取光谱一致，在239 nm有最大吸收，在232 nm和248 nm有两个肩峰(见图 3A)；红曲对照药材在上述出峰位置处的UV提取光谱（图 3B）与酸型和内酯型洛伐他汀对照品的一致；各样品在上述出峰位置处的色谱峰UV提取光谱基本一致，见图 3C，与酸型和内酯型洛伐他汀的提取光谱均有显著性差异，而且其他响应值较高的色谱峰UV提取光谱与洛伐他汀的差异也非常显著，提示这5批样品中他汀类物质的含量很低（洛伐他汀的最低检出限约为1 ng）。采用《中国药典》（2015年版一部）“血脂康胶囊”项下的“红曲”含量测定方法（甲醇-水系统）^[9]，检验结果一致，即5批红曲样品中的内酯型或酸型洛伐他汀含量均低于检出限。

对照药材能呈现出紫色红曲霉发酵菌的典型特征，例如有分支、带横隔的菌丝体、球型子囊壳（闭囊壳）、孢子等^[10]，而这5批红曲样品中却难以发现上述典型特征，提示流通市场上的红曲药材质量亟需规范。

6 结论与讨论

从流通市场上随机抽取的5份红曲药材中均未检出洛伐他汀，显微鉴别也没有发现紫色红曲霉发酵菌应具备的典型特征，而且它们的指纹图谱与药典收载的对照指纹图谱均有显著性差异，彼此之间的指纹图谱也存在显著性差异，提示红曲药材的质量一致性较差，亟需规范提高。

《中国药典》（2015版）中收载的许多中成药，如血脂康片/胶囊、舒筋活络酒、新癀片、再造丸、国公酒等，处方中均含红曲药材，但仅血脂康胶囊/片项下收载了其原料红曲的质量标准，无单独、统一的红曲药材国家标准。现有地方红曲中药材标准亦不统一，多以显微鉴别和水分控制为主，难以合理引导国内红曲产业的规范化。

红曲属于发酵产品，它的发酵菌株、发酵方式、发酵时间、培养基质、pH等因素均会影响红曲的代谢产物种类和含量^[11-12]。后续工作中，本课题组将收集更多的红曲样品，以活性为导向，深入探索影响红曲药材质量的关键因素及质量控制的合理途径，为制订科学的红曲质量标准提供科学依据。