少腹逐瘀丸具有温经活血、散寒止痛之功效。用于寒凝血瘀所致的月经后期、痛经，产后腹痛等^[1-2]。由当归、蒲黄、五灵脂、赤芍、小茴香、延胡索、没药、川芎、肉桂、炮姜10味处方组成。现行标准为《中国药典》2010年版一部^[3]，仅收载了当归、蒲黄、赤芍、小茴香、延胡索、肉桂的显微鉴别及赤芍中芍药苷的薄层鉴别，而中药制剂的活性成分含量高低是反映其有效性的重要指标，且本处方挥发性成分药材居多，为达到对多味药材、多个活性成分的有效控制，有必要采用GC法^[4]，开展肉桂（桂皮醛）^[5-6]、小茴香（反式茴香脑）^[7-8]、当归与川芎（蒿本内酯）^[9-12]的含量测定，以达到更有效地控制产品质量，保证临床用药安全有效的目的。

1 仪器与试药

仪器：Agilent7890A气相色谱仪，FID检测器；对照品：桂皮醛（中国药品生物制品检定所，批号：110710-201016），反式茴香脑（中国药品生物制品检定所批号：111835-201102），蒿本内酯（北京世纪奥科生物技术有限公司批号：MUST-14032414）；样品：少腹逐瘀丸（批号：7280003，某药业）及国家计划抽验样品21批；其他试药均为分析纯。

2 方法与结果 2.1 色谱条件

色谱柱：D M - 5（5 %二苯基- 9 5 %二甲基聚硅氧烷固定液）毛细柱（30 m×0.32 mm，0.53 μm）；进样口温度：200 ℃；检测器：FID检测器，温度为300 ℃；进样口分流比：1︰1；柱流量：3 mL·min^-1；进样量：1 μL；色谱柱升温程序见表 1。

2.2 供试品溶液的制备

取样品，剪碎，取约5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水5 mL，精密加入乙酸乙酯25 mL，称定重量，超声提取（功率：250 W，频率：33 kHz）20 min，再水浴中加热回流1 h，称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 对照品溶液的制备

取桂皮醛、反式茴香脑及蒿苯内酯对照品适量，精密称定，分别加乙酸乙酯制成每1 mL含30μg、20μg及100μg的溶液，即得。

2.4 专属性试验

取处方中各味药材及辅料，按本品工艺及供试品溶液的制备方法，制备肉桂阴性供试品溶液、小茴香阴性供试品溶液及当归与川芎阴性供试品溶液，注入气相色谱仪进行测定，结果：阴性均无干扰，专属性良好，见图 1~7。

2.5 线性关系考察

取不同浓度的对照品溶液分别进样，测定其峰面积，以峰面积值（y）为纵坐标，进样浓度（x）为横坐标，绘制标准曲线，测得回归方程：

y_桂皮醛=4.2546x－4.4323 R²= 0.9999

y_{反式茴香脑}=4.6949x－15.2392 R²= 0.9990

y_蒿本内酯=4.6949x－15.2392 R²= 0.9990

结果表明，桂皮醛在7.500~480.0 μg·mL^-1、反式茴香脑在5.145~658.6 μg·mL^-1、蒿苯内酯在9.000~450.0 μg·mL^-1，峰面积值与进样浓度有良好的线性关系，见表 2。

2.6 精密度考察

精密吸取同一份对照品溶液，重复进样6次，结果桂皮醛、反式茴香脑及蒿苯内酯的平均峰面积分别为121.18、89.05、367.95，RSD分别为1.3%、0.67%、0.50%，表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性考察

取同一供试品（批号：7280003）溶液，分别于配制后0、2、4、8、16、24 h测定峰面积，结果桂皮醛、反式茴香脑及蒿苯内酯的平均峰面积分别为151.18、102.00、497.85，RSD分别为0.36%、1.5%、0.19%，表明供试品溶液在24 h内基本稳定。

2.8 重复性考察

按拟定含量测定方法，对同一批号（批号：7280003）的6份样品进行平行试验，测得桂皮醛、反式茴香脑及蒿苯内酯的平均含量分别为0.1854 mg·g^-1、0.1175 mg·g^-1、0.7612 mg·g^-1，RSD分别为0.69%、1.2%、0.14%，结果表明该方法的重复性良好。

2.9 加样回收率试验

采用加样回收法，取上述重复性试验所用的样品（批号：7280003）1.5 g、2.5 g、3.5 g，精密称定，分别精密加入浓度为0.02400 mg·mL^-1的桂皮醛对照品溶液25 mL，按拟定含量测定方法制备，依法测定，计算回收率；取样品1.5 g、2.5 g、3.5 g，精密称定，分别精密加入浓度为0.009879 mg·mL^-1的反式茴香脑对照品溶液25 mL，按拟定含量测定方法制备，依法测定，计算回收率；另取样品1.5 g、2.5 g、3.5 g，精密称定，分别精密加入浓度为0.04500 mg·mL^-1的蒿本内酯对照品溶液25 mL，按拟定含量测定方法制备，依法测定，计算回收率，结果见表 3~5。

2.10 检测限与定量限考察

根据桂皮醛、反式茴香脑及蒿苯内酯对照品溶液S/N=3及S/N=10时的溶液浓度，分别计算出检测限和定量限，结果见表 6。

2.11 样品的测定

按拟定方法对6批调研样品及国家评价性抽验的21批次样品进行测定，测得桂皮醛含量范围为0.0917~5.5732 mg/丸，反式茴香脑含量范围为0.0549~5.7544 mg/丸，蒿苯内酯含量范围为0.3739~8.8706 mg/丸，数值具体分布见图 8~10，可看出由于原标准的不完善，样品中相关药味的质量参差不齐，对疗效肯定会有一定的影响。

3 讨论

作为常用中药当归和川芎中含量较高的活性成分，蒿苯内酯一直被广泛关注。但蒿本内酯化学性质不稳定，有文献报道其纯品室温下极不稳定，4℃冰箱冷藏15天有约10%降解，但同时认为其在挥发油中基本稳定^[13-16]。在试验中，笔者严格按照对照品说明书保存对照品，对配制后的对照品溶液及时冷藏，在使用时随时观察对照品溶液的稳定性。在提取过程中，考虑到蒿苯内酯的稳定性，也采用了乙酸乙酯水浴加热回流的方式提取样品，以降低加热温度。整个分析测定在24小时内完成，以减少其降解的可能性。结合方法学考察结果来看，在整个分析过程中，蒿苯内酯基本稳定，可满足定量分析的需要。但另一方面，由于蒿苯内酯稳定性较差，中成药中化学成分复杂，不同成分间相互作用不可避免，使用蒿苯内酯作为指标性成分控制中药质量还需进一步研究。在今后的工作中，还将对蒿苯内酯的稳定性进行深入研究，积累更多的数据，为使用该活性成分控制中药质量打下基础。