溶出度试验是评价口服固体制剂内在质量的一种重要手段，旨在保证不同企业所生产的同一口服固体制剂具有相同的品质和疗效。随着研究的不断深入，对其认识与理解亦在发生不断的变化^[1-3]。药物在进行溶出度评价时，进行多个介质中的测定和比较是十分必要的^[4]。在进行复方甘草酸苷片制工艺研究过程中发现，滤膜吸附对不同介质中复方甘草酸苷片的溶出度均有不同程度的干扰，在某些介质中吸附尤为严重。滤膜吸附饱和过程与滤膜的品牌和性质、药物的理化性质、是否经微粉化处理等因素有关。因此，在建立溶出度测定方法前，应进行详细的验证^[5]。本文研究滤膜吸附对复方甘草酸苷片在不同介质中溶出度的干扰，为其溶出度的测定提供依据。

1 仪器与试药

Laballiance高效液相色谱仪，包括SeriesIII型二元梯度泵Model 500检测器；色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶（Dikma C18，4.6 mm×150 mm，5 µm）、TGL-18C型普通台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；电子天平（AG135，METTLER TOLEDO）；4020P超声波清洗器（Korea，JAC Company）；PHS-3C型pH计（上海精密科学仪器有限公司）。津隆滤膜（有机系）：孔径0.45μm，天津市科亿隆实验设备有限公司生产；津腾滤膜（有机系）：孔径0.45μm，天津市津腾实验设备有限公司生产；津腾滤膜（水系）：孔径0.45μm，天津市津腾实验设备有限公司生产。

复方甘草酸苷片（秋山片剂株式会社，规格：每片含甘草酸苷25 mg、甘氨酸25 mg、DL-蛋氨酸25 mg，批号：12154）。

2 方法与结果 2.1 色谱条件与系统适用性试验

甘草酸苷：C18色谱柱（Dikma 4.6 mm× 250 mm，5μm），以乙腈-0.01M磷酸（45：55）为流动相，检测波长为252 nm，进样量为20 µL，流速为1.0 mL·min^-1。主峰分离度不得小于2.0，拖尾因子不得大于2.0，理论板数按甘草酸苷峰计算不低于2500。

甘氨酸、DL-蛋氨酸：C18色谱柱（Dikma 250 mm×4.6 mm 5μm），以乙腈-0.05M醋酸钠缓冲液（40：60）为流动相，检测波长为360 nm，进样量为20 µL，流速为1.0 mL·min^-1。主峰分离度不得小于1.5，拖尾因子不得大于2.0，理论板数分别按甘氨酸和DL-蛋氨酸衍生物色谱峰计，不得小于2500。

2.2 供试品溶液制备

取复方甘草酸苷片20片，研细，取粉末适量，分别以水、pH 1.0盐酸、pH 4.5磷酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液为溶剂，配制高、中、低3种浓度的供试品溶液，每一浓度的样品分别用3种不同滤膜过滤，作为过滤样品，并取适量离心上清液作为未过滤样品。

2.3 测定及结果

甘草酸苷：直接取供试品溶液20 µL注入液相色谱仪，记录峰面积。峰面积见表 1。

甘氨酸、DL-蛋氨酸：精密量取各供试品溶液1 mL，置10 mL量瓶中，衍生^[6]后过滤，取续滤液20 µL注入液相色谱仪，记录峰面积。峰面积见表 2、表 3。

2.4 吸附率的计算

计算公式：吸附率= |A_x-A₀|/A₀×100%，式中A_x为滤过液的峰面积平均值，A₀为未滤过液峰面积平均值，按照吸附率计算公式分别计算微孔滤膜对甘草酸苷、甘氨酸、蛋氨酸的吸附率，结果见表 4~表 6及图 1~图 3。

3 讨论

滤膜吸附对复方甘草酸苷片的溶出度测定有不同程度的干扰：①不同滤膜吸附作用不同，2种有机膜的吸附作用大于水膜；②同一滤膜对不同成分吸附作用不同，对甘草酸苷的吸附作用较大，对甘氨酸和蛋氨酸吸附较小；③对不同浓度溶液吸附作用不同，总体而言，对低浓度溶液吸附作用大于对高浓度溶液吸附作用；④对不同介质中同一成分的吸附作用不同，尤其是在pH 1.0盐酸中，2种有机膜对甘草酸苷吸附率达到70%以上，水膜吸附率20%以上。

滤膜吸附对溶出度的干扰不可忽视，在进行溶出试验前必须根据所测品种的特点，对滤膜干扰进行充分验证，选择适当的滤膜或者适当的方法降低及消除滤膜的干扰。通过蒸煮滤膜、更换大孔径滤膜、弃去初滤液的体积＞5 mL、离心处理溶出液均能有效减少和防止滤膜对药物吸附产生的干扰^[7-8]。谢沐风^[5]等指出如滤膜对药物有吸附，可将滤膜在沸水中煮沸1 h，或加大初滤液体积等。但仍建议采用样品直接高速离心的方法。

笔者在实验过程中遇到大部分滤膜干扰试验只是针对一种介质进行的，尤其在做仿制药与原研产品f₂因子比较时，不同介质中滤膜吸附干扰程度不同，各介质中均应进行滤膜吸附试验。