硬脂酸镁，分子式为C₃₆H₇₀MgO₄。它是目前用得最多的一种抗结剂，有润滑性强，抗粘性好，质量轻，比容大，且与颗粒混合后分布均匀，附着力好而不易分开等优点^[1]。主要用作润滑剂、抗粘剂、助流剂^[2-3]。硬脂酸镁特别适宜油类、浸膏类药物的制粒，制成的颗粒具有很好的流动性和可压性。据美国食品和药品管理局（FDA）报道，硬脂酸镁是目前制药行业应用最为广泛的一种润滑剂^[4-6]。本品是将0.5%硬脂酸镁加在盐酸二甲双胍原料药中，如何检验并严格控制硬脂酸镁的量，成为此类制剂（预混物）的难点。盐酸二甲双胍是应用最为广泛的有效治疗Ⅱ型糖尿病的口服双胍类药物，临床应用已超过数十年时间^[7]，它可以有效降低血糖及血脂^[8-9]。除此之外，研究表明它还具有抗动脉粥样硬化^[10-11]和减少Ⅱ型糖尿病患者发生肿瘤^[11-12]等作用。近年来，柱前衍生化法已被证明了其在成分测定中的有效性^[13-15]，是常用的检测方法之一。参考相关资料^[16-20]，本研究建立了GC柱前衍生化法测定硬脂酸镁的含量，为严格控制此类制剂中硬脂酸镁的量提供了依据。

1 仪器与试药

岛津GC-2010 plus气相色谱仪，FID为检测器，SPBq全自动空气源。盐酸二甲双胍+0.5%硬脂酸镁（批号：C17751、C17747、C17748D）、硬脂酸镁对照品（批号：C315614，含量100.0%）、盐酸二甲双胍对照品（批号：17252，含量100.0%），均由法国MERCK SANTE CALAIS提供；菲为内标物（批号：#J1421070，由阿拉丁中国公司提供），乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 衍生化条件及色谱条件 2.1 衍生化条件

衍生化试剂：12%三氟化硼甲醇溶液；反应温度：50 ℃, 反应时间：15 min。

2.2 色谱条件

色谱柱：TG-WAXMS石英毛细管柱（30 m×0.53 mm），聚乙二醇-20M为固定液，FID为检测器，SPB-3全自动空气源，进样口温度250 ℃，检测器温度250 ℃，起始温度190 ℃，以4 ℃·min^-1的速率升温至220 ℃，维持15 min，载气为氮气，进样体积1 μL。

3 含量测定方法 3.1 内标溶液的制备

取菲适量，用正庚烷溶剂稀释制成每1 mL含1 mg的溶液。

3.2 供试品溶液的制备

取本品2 g，精密称定，置50 mL的具塞锥形瓶中，加12%三氟化硼甲醇溶液15 mL，在50 ℃水浴振荡器加热15 min，放冷，精密加入正庚烷密塞，强力振摇10 min，静置分层，取上层液作为供试品储备液。

3.3 对照品溶液的制备

取盐酸二甲双胍对照品2 g和硬脂酸镁对照品10 mg，精密称定，置同一50 mL的具塞锥形瓶中，按“3.2”节方法操作，制备对照品储备液。

3.4 样品的测定

精密量取对照品储备液和供试品储备液各5 mL，分别置10 mL量瓶中，精密加入内标溶液用正庚烷稀释至刻度，分别作为对照品溶液和供试品溶液。精密量取上述溶液各1 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图（见图 1），计算棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯峰面积之和，按内标法以峰面积计算，即可测得硬脂酸镁的含量。

3.5 线性关系考察

取盐酸二甲双胍对照品0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 g，分别加入硬脂酸镁对照品2.5、5、10、15、20 mg，精密称定，分别置50 mL具塞锥形瓶中，按“3.2”节方法操作，制备对照品系列溶液。按上述色谱条件，采用内标法，以硬脂酸镁浓度为横坐标，棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯峰面积之和与内标峰面积之比为纵坐标，绘制标准曲线，求得线性回归方程：

$Y=0.3152X－0.03056\ \ \ r=0.9996$

硬脂酸镁浓度在0.125~1.00mg·mL^-1与峰面积呈良好的线性关系。

3.6 精密度试验

以同一供试品溶液连续重复进样5次，记录色谱图，以棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯峰面积之和与内标峰面积之比计算，其RSD为1.0%。

3.7 稳定性试验

取同一供试品溶液，按上述色谱条件，于配制后每隔4 h进样测定，共测定6次，结果表明：供试品溶液在24 h内稳定，棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯峰面积之和与内标峰面积之比的RSD为1.3%。

3.8 定量限和检出限

采用“3.5”节中对照品系列溶液逐级稀释，按上述色谱条件，进样分析，按信噪比为3确定最低检测限（LOD）为15 ng·mL^-1，按信噪比为10确定最低定量限（LOQ）为45 ng·mL^-1。

3.9 回收率试验

采用“3.5”节中溶液作为供试品溶液，按上述色谱条件测定，计算回收率，平均回收率为100.01%，RSD为0.45%（n=5），结果见表 1。

4 讨论 4.1 反应原理及效果

硬脂酸镁是硬脂酸经皂化后，加硫酸镁溶液进行复分解反应，所得沉淀经离心干燥所得。系以硬脂酸镁（C₃₆H₇₀MgO₄）与棕榈酸镁（C₃₂H₆₂MgO₄）为主要成分的混合物。50 ℃水浴振荡器中加热15 min，与12%三氟化硼甲醇溶液在一定条件下反应，采用不饱和酸甲酯化方法使其生成棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯，从而降低了沸点，用菲作内标，计算棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯峰面积之和，达到检测并计算硬脂酸镁含量的目的。在该色谱条件下，棕榈酸甲酯峰和硬脂酸甲酯峰及内标峰的分离度达到10以上，理论板数不低于15000，效果满意。

4.2 衍生化反应条件的优化

参考有关资料，选用不同温度（40℃、50℃、60 ℃）和回流时间（10 min、15 min、20 min、30 min）及不同浓度的衍生化试剂进行多次试验，最终确定50 ℃水浴振荡器中加热15 min，甲酯化反应比较完全。由于该预混物中99.5%是盐酸二甲双胍，所以，在试验中分别做了阴性对照及阳性对照，结果表明：在大量的盐酸二甲双胍存在情况下，不影响脂肪酸衍生化反应；用三氟化硼作为衍生化试剂，其甲酯化反应较为快捷，且试验稳定性及精密度良好；衍生化产物棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯选择正庚烷提取，峰面积均比较稳定。