邻苯二甲酸酯（phthalic acid esters, PAEs）又称酞酸酯，是邻苯二甲酸形成的酯的统称。主要用于聚氯乙烯材料，使聚氯乙烯由硬塑胶变为有弹性的塑胶，起到增塑剂的作用。世界卫生组织已将PAEs公布为内分泌干扰物，其对生殖系统、内分泌系统、神经系统等存在毒性效应^[1-3]。PAEs与树脂以物理融合方式结合；在存放不当的条件下，如高温、加热或与油脂性物质接触等情况下，很容易向所包装药物迁移，给用药安全带来潜在危害^[4]。

保和丸大蜜丸剂型，常采用聚氯乙烯固体药用硬片与药用铝箔构成的泡罩包装。聚氯乙烯固体药用硬片最常用的增塑剂有邻苯二甲酸二丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯(DEHP)等^[5]。

目前，PAEs的检测方法主要有气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）和高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS），其中，应用最为广泛的是GC和GC-MS ^[6-7]。本文建立了同时测定6种常用邻苯二甲酸酯类含量的气相色谱法，并对保和丸中迁移的PAEs进行了检测。

1 仪器与试剂

PerkinElmer Clarus 680气相色谱仪，FID检测器（PerkinElmer公司），Elite-5（30 m×0.32 mm，0.25 μm）毛细管色谱柱（5%苯基-95%二甲基聚硅氧烷，PerkinElmer公司）；Agilent GC 6890N-5975B气-质联用仪（Agilent公司）；赛多利斯BP-211D型电子天平（Sartorius公司）；BL610型电子天平（Sartorius公司）。

邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二乙酯（DEP）、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯、邻苯二甲酸二壬酯（DNNP）、邻苯二甲酸二正辛酯，购自Dr.Ehrenstorfer公司。二氯甲烷、甲醇试剂均为色谱纯。

保和丸样品1（山西康威制药有限责任公司，批号：2120406）；保和丸样品2（青海宝鉴堂国药有限公司，批号：WJ631096）；保和丸样品3（山西旺龙神农药业有限公司，批号：20111101）。

2 方法与结果 2.1 气相色谱条件

色谱柱为Elite-5（30 m×0.32 mm，升温程序：起始温度60 ℃，保持1 min，以20 ℃· min-1升温至220 ℃，保持1 min，再以5 ℃·min^-1升温至280 ℃，保持4 min；进样口温度：250 ℃；检测器温度：300 ℃；载气为氮气，恒定流速不分流进样；进样量：1 μL。

2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品储备液的制备

精密称取DMP、DEP、DBP、DEHP、DNNP、DNOP，用二氯甲烷分别配制成浓度为0.1930、0.0988、0.1812、0.1861、0.0862、0.1320 g·L^-1的对照品溶液，摇匀备用。

2.2.2 供试品溶液的制备

取一粒完整包装的大蜜丸，将PVC硬片剪碎，精密称定其质量，10 mL二氯甲烷溶剂浸泡15 min，提取液定容至10 mL，作为包材供试品溶液；将药丸切成小块，精密称定其质量，10 mL乙酸乙酯超声提取5 min，提取液浓缩至2 mL，作为药品供试品溶液。

2.3 系统适用性试验

在“2.1”节的色谱条件下，分别取空白溶剂、对照品混合溶液进样，各PAE s的理论塔板数均大于10000，相邻PAE s的分离度均大于1.5。空白溶剂色谱图中，无干扰测定的杂质峰。见图 1。

2.4 线性关系考察

取6种对照品储备液，分别配制成各自浓度梯度的溶液。将上述配制的溶液各进样1 μL（n = 5），记录色谱图，以样品质量浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果见表 1。

2.5 精密度试验

在“2.1”节色谱条件下，取配制的对照品混合溶液连续进样6次，记录色谱图。测得DMP、DEP、DBP、DEHP、DNNP、DNOP峰面积RSD分别为0.59%、0.75%、0.31%、0.21%、1.36%、0.64%。

2.6 稳定性试验

取“2.5”节中配制的对照品混合溶液，于0、2、4、6、8、10、12、24 h分别进样，记录色谱图。测得DMP、DEP、DBP、DEHP、DNNP、DNOP的峰面积RSD分别为0.84%、1.10%、0.81%、0.31%、0.98%、0.77%，表明样品溶液室温放置内稳定性良好。

2.7 回收率试验

精密称取9份保和丸样品1的聚氯乙烯固体药用硬片包装（每份0.5 g，剪碎），分成低、中、高浓度组，每组3个样本，分别加入低、中、高3个不同浓度的6种PAEs混合对照品溶液，然后加入10 mL二氯甲烷溶剂浸泡15 min，浸提液定容至10 mL，分别进样测定，记录色谱图。按外标法计算回收率，分别计算低、中、高浓度组的平均回收率，再计算低、中、高浓度所有样本的总平均回收率。结果见表 2。平均回收率在96.8% ~ 100.4%，表明回收率良好。

2.8 检出限

取对照品溶液采用逐步稀释法制成一定浓度的溶液，以信噪比（S/N）为3：1时确定其检出限。6种PAEs的检出限测定结果见表 1。

2.9 样品中PAEs的测定

按“2.2.2”节下的配制方法制备供试品溶液，进行测定，按外标法计算样品中PAEs的含量，3批样品中均只检出DEHP，而DMP、DEP、DBP、DNNP、DNOP均未检出，DEHP含量测定结果见表 3。

2.10 样品的加速试验研究

参照《药品包装材料和药物相容性试验指导原则》（YBB00142002-2015）^[8]，将3批样品放置在40℃、相对湿度90%的环境下，分别于5、10、15、30、40 d对药品中的PAEs进行检测，考察药品中PAEs迁移量的变化情况，结果见表 4。

3 GC-MS确认

色谱柱：HP-5MS（30 m×0.25 mm×0.25μm）石英毛细管柱，载气为氦气。升温程序：初温60 ℃，保持1 min，以20 ℃·min^-1的速率升至保持1 min，再以5 ℃·min^-1升温至保持7 min。进样口温度：250 ℃；色谱-质谱接口温度：300 ℃。电离源为EI源，电离能量：70 eV，选择监视离子（m/z）：149 amu，进样量：1 μL，不分流进样。

取供试品溶液和DEHP的对照品溶液分别注入气质联用色谱仪，记录色谱图及质谱图。供试品溶液和对照品溶液的选择离子色谱峰在相同保留时间处出现，且对应质谱碎片离子的质荷比与对照品一致，均出现149、167和279的碎片峰，确证该样品中检出的是DEHP。

4 结论与讨论

本文在参照文献^[9-11]的基础上，建立了测定6种常用邻苯二甲酸酯类（PAEs）含量的气相色谱法，并对保和丸的聚氯乙烯固体药用硬片与药品中的PAEs进行了检测。该方法分离效果好、操作简便快速、灵敏度高、精密度好，为考察药品中PAEs迁移量的检测提供依据。

3批样品的包材和药品中均有PAEs检出。样品储存温度升高、湿度加大的加速试验结果显示：随着放置时间增长，药品中PAEs的迁移量也增加，证实环境条件变化，包材中的PAEs会迁移到制剂中。