近年来，在GMP认证检查中，审计追踪和数据可靠性检查日趋成为重中之重。世界卫生组织（WHO）陆续公布了关于数据及记录质量管理规范指南，美国联邦法规也公布了数据可靠性工业指南，我国2010年修订的《药品生产质量管理规范》 ^[1]第七章对设备及仪器也提出相应的要求。由此可见，企业的设施设备和检验仪器的确认与验证，在GMP认证检查和企业生产中占据越来越重要的地位。全自动血凝仪采用无样品干扰的双磁路磁珠法的工作原理，用于临床和实验室中的人血浆样本或凝血因子产品的活性检测，对于凝血因子合成增加或异常而导致的血栓疾病的临床诊断、治疗及凝血因子产品的质量控制具有重要意义。目前国际、国内均已对分析仪器开始实施全面系统的设备仪器确认并提出了相应要求^[2-6]，为了检验该仪器是否能稳定地提供准确的实验数据，本文按照要求对全自动血凝仪进行了设备仪器的确认。

1 材料与方法 1.1 材料

仪器校准品(Unicalibrator，批号111675）、正常值质控血清(System Control N，批号114053)、病理值质控血清(System Control P，批号114053)、APTT、PT、人凝血因子Ⅱ/Ⅶ/Ⅷ/Ⅸ/Ⅹ缺乏血浆，均购自法国STAGO公司。

仪器：STAGO全自动血凝仪，法国STAGO公司生产，型号STA Compact。

1.2 方法 1.2.1 安装确认（IQ）

确认仪器设备放置、电源、配套显示器、打印机、仪器设备连接是否完好，人员已培训，相应的标准操作规程等准备完毕并形成记录。

1.2.2 运行确认（OQ）

准确度确认：采用System Control N、System Control P测定内源性凝血因子（例如Ⅷ因子）和外源性凝血因子（例如Ⅶ因子）效价。

精密度确认：分别对System Control N、System Control P的Ⅱ因子和Ⅹ因子效价测定10次，计算均值、SD及CV值。

干扰实验确认：分别制备混合血浆S1（1.0 mL System Control N+0.5 mL System Control P）和混合血浆S2（0.5 mL System Control N+1.0 mL System Control P）各3支，按随机排列放入仪器样品测定池中测定Ⅷ因子效价；对照组采用System Control N，进行Ⅷ因子效价3次重复性测定。

1.2.3 性能确认（PQ）

取1批批签发检验合格的人凝血因子Ⅷ 6瓶，作为6个独立样品，按实验室人凝血因子Ⅷ效价测定SOP及STAGO凝血分析仪相关操作程序进行人凝血因子Ⅷ效价检测。

2 结果 2.1 安装确认结果

设备的安装环境（如温度、湿度、电压等）符合设备安装条件要求，设备安装过程中未出现异常，设备安装完毕后逐条记录并完成设备档案。

2.2 运行确认结果

准确度：System Control N、System Control P的Ⅷ因子和Ⅶ因子3次效价测定结果均在标示的质控范围内，见表 1。

精密度确认：对System Control N、System Control P分别测定10次Ⅱ因子、Ⅹ因子效价，其CV值均小于10%，结果见表 2。

干扰实验确认：取混合血浆S1和S2各3支，Ⅷ因子效价测定结果和对照组Ⅷ因子效价测定结果的CV值小于10%，见表 3。

2.3 性能确认结果

6瓶凝血因子Ⅷ样品效价测定值均在批签发合格范围内（标示量的80%~140%），且6瓶样品测定的CV值（2.05%）小于10%，见表 4。

3 讨论

随着数据可靠性检查成为国内企业接受WHO^[7]或欧盟GMP检查及我国GMP检查中的重点内容之一，设施设备和检验仪器的确认与验证在GMP认证检查中和企业生产过程中的重要性不言而喻。对于数据可靠性的理解，从广义上说是所有数据的真实性、完整性、可追溯性，从狭义上说是QC数据真实性、完整性。因而对于企业QC实验室，如何规范进行检验仪器的确认与验证是目前面临的紧迫任务，也是一个需要不断完善的课题。

我国对于国内血液制品企业提出了加强人血浆资源综合利用、加快人凝血因子产品研发的一系列要求^[8]。在临床上治疗血友病等疾病方面，人凝血因子产品有着不可替代的作用，是血友病人的终生用药。人凝血因子效价是该产品发挥临床作用非常重要的质控指标。全自动血凝仪在测定人凝血因子产品效价时起到了重要的作用。本文选取人凝血因子产品、以全自动血凝仪为例，对检验仪器的确认与验证实验进行了研究，具有很好的实际意义。

目前，国际上通用的凝血因子效价检测方法主要有凝集法和显色法^[9]，2005年版至2015年版《中国药典》 ^[10]收入的人凝血因子效价测定方法均为凝集法^[11]。STAGO全自动血凝仪的凝集法测量采用无样品干扰的双磁路磁珠法，工作原理即通过电磁传感器检测反应杯中钢珠摆动幅度的变化^[12]。检测开始时两个独立的驱动线圈产生的交替电磁场驱使钢珠在两条弧形轨道（反应杯中）中摆动。加入样品后，如果检测介质的黏度不变，钢珠摆动的振幅衡定；如果检测介质的黏度增加，钢珠摆动的振幅衰减。磁场的强度可以根据不同检测项目和血浆凝块类型而改变。钢珠在反应杯中的位置信号被传感器接收，通过一系列运算法则把振幅的改变换算成凝固时间。

在STAGO全自动血凝仪的验证过程中，IQ中记录仪器各项指标均符合规定，并形成文件记录等；OQ中进行了准确度确认、精密度确认、干扰实验确认；PQ中对已获批签发的合格样品进行检测，单瓶样品结果及瓶间差异均符合规定。各项结果显示，各阶段操作均符合设备确认要求及预期使用目的，STAGO全自动血凝仪在人凝血因子效价测定的实验研究中，基本完成了全面验证。