文章摘要
张黎,聂建辉,李倩倩,吴佳静,王威,刘欢,秦海洋,王佑春,黄维金,侯继锋.献浆员中新型冠状病毒SARS-CoV-2中和抗体检测分析[J].中国药事,2020,34(3):260-265
献浆员中新型冠状病毒SARS-CoV-2中和抗体检测分析
Detection and Analysis of Novel Coronavirus SARS-CoV-2 Neutralizing Antibodies in Plasma Donors
投稿时间：2020-02-28  
DOI：10.16153/j.1002-7777.2020.03.002
中文关键词: 新型冠状病毒SARS-CoV-2  中和抗体  静注人免疫球蛋白  血浆  筛选
英文关键词: novel coronavirus SARS-CoV-2  neutralizing antibody  intravenous injection of human immunoglobulin  plasma  screening
基金项目:十三五传染病重大专项课题资助项目（编号2018ZX10731101-002-006、2018ZX10731101-002-009、2018ZX10731101-001-006）；创新生物技术药评价及标准化关键技术研究（编号2018ZX09101001）
作者单位E-mail
张黎 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
聂建辉 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
李倩倩 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
吴佳静 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
王威 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
刘欢 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
秦海洋 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
王佑春 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629  
黄维金 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629 huangweijin@nifdc.org.cn 
侯继锋 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629 houjf@nifdc.org.cn 
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中文摘要:
      目的： 静注人免疫球蛋白（IVIG）和新冠肺炎恢复者的血浆已被推荐用于重症新冠肺炎患者的治疗。因此，血浆中新型冠状病毒（SARS-CoV-2）中和抗体水平需要得以及时评价。本研究利用不需要在生物安全三级实验室操作的SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法，建立了快速检测中和抗体的策略。方法： 采用新型冠状病毒SARS-CoV-2假病毒，对1080份健康献血员血浆及26批次IVIG的SARSCoV-2中和抗体进行检测。初筛采用1：30倍稀释检测；对初筛阳性（抑制率≥ 50%为阳性）的样本进行复试，复试采用1：30、1：90和1：270三个梯度；对于复试阳性的样本进行中和特异性分析，进一步检测针对水疱性口炎病毒（VSV）、严重急性呼吸道综合征冠状病毒（SARS-CoV）和中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）的中和活性。结果与结论： 在1：30倍稀释时，26批次IVIG的SARS-CoV-2中和抗体均为阴性，1080份献血员血浆中SARS-CoV-2中和抗体阳性率为0.6%（6/1180）；对6份阳性血浆的特异性分析显示均为对VSV、SRAS-CoV或MESR-CoV假病毒的非特异中和作用。本研究表明该假病毒中和抗体检测方法和快速检测策略可以用于IVIG、健康献血员和感染者恢复期血浆中的中和抗体检测，发现IVIG针对SARS-CoV-2无特异的中和抗体活性，IVIG在临床重症治疗中发挥的是非病毒特异的辅助治疗作用。
英文摘要:
      Objective: Human immunoglobulin for intravenous injection(IVIG) and the convalescent plasma of the COVID-19 patients are recommended for the treatment of patients with severe novel coronavirus pneumonia. Hence, the levels of neutralizing antibody against novel coronavirus SARS-CoV-2 in plasma need to be evaluated in time. In this study, a rapid screening strategy for determining neutralizing antibodies against SARS-CoV-2 was established using the SARS-CoV-2 pseudovirus by which biosafety Level 3 laboratory is not required. Methods: The novel SARS-CoV-2 pseudovirus was used to detect SARS-CoV-2 neutralizing antibodies in 1080 healthy donors and 26 batches of IVIG. In the initial screening, 1:30 times dilution was used; in the repeated screening, dilutions of 1:30, 1:90 and 1:270 were used for the samples showed as positive in the initial screening (inhibition rate ≥ 50%); a neutralization-specific analysis was performed for the positive samples in the repeated screening, and their neutralizing activities for the vesicular stomatitis virus (VSV), severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) and Middle East respiratory syndrome coronavirus (MERS-CoV) were further detected. Results and Conclusion: At 1:30 dilution, 26 batches of IVIG were all negative, and the positive rate of the 1080 blood donors was 0.6% (6/1080); 6 positive samples also showed nonspecific neutralizing effect on VSV, SARS-CoV and MERS-CoV in the further specific identification assay. This study showed that the pseudovirus based rapid SARS-CoV-2 neutralizing antibody assay could be apply to the evaluation of neutralizing antibodies of IVIG in healthy donors and convalescent plasma in infected persons. It demonstrated that IVIG had no specific neutralizing antibody activity against SARS-CoV-2, and IVIG migth play a non-viral-specific supplementary role in the clinical treatment of severe patients.
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